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以下是DNA凝膠電泳中膠塊出現(xiàn)一半白一半黑現(xiàn)象的詳細(xì)解析及解決方案:
一、主要原因分析
染色不均勻?
溴化乙錠(EB)或SYBR Green等染料未充分混勻,導(dǎo)致局部過(guò)度染色(顯黑色)而其他區(qū)域染色不足(顯白色)?
染色時(shí)間不足或染料失效(如Genefinder反復(fù)凍融)也可能引發(fā)此現(xiàn)象?
凝膠制備問(wèn)題?
瓊脂糖溶化時(shí)溫度過(guò)高或攪拌不均,造成凝膠濃度/厚度不一致?
倒膠過(guò)程中混入氣泡或凝固速度不均,影響內(nèi)部結(jié)構(gòu)均一性?
成像系統(tǒng)故障?
紫外燈光源老化或?yàn)V光片波長(zhǎng)不匹配,導(dǎo)致顯影亮度不均?
成像儀參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤(如曝光時(shí)間或?qū)Ρ榷犬惓??
二、解決方案
染色步驟優(yōu)化?
染色前渦旋混勻染料,確保溶解無(wú)沉淀?
采用新鮮配制的染色液,避光保存避免降解?
制膠標(biāo)準(zhǔn)化操作?
控制溶膠溫度在60-65℃,微波加熱時(shí)間歇攪拌?
倒膠前靜置消泡,使用水平臺(tái)確保凝膠厚度一致?
設(shè)備檢查與校準(zhǔn)?
更換紫外燈管或調(diào)整成像儀光源均勻性?
通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker驗(yàn)證成像系統(tǒng)性能?
三、預(yù)防措施
每次實(shí)驗(yàn)前檢查染色劑活性(如用已知濃度DNA測(cè)試)?
定期維護(hù)電泳設(shè)備,更換陳舊緩沖液(推薦0.5×TBE每3次實(shí)驗(yàn)更換)?
BS-300 | 基礎(chǔ)性電泳儀電源 |
BS-600C | 通用型電泳儀電源 |
BS-mini01 | 垂直電泳槽(雙板) |
BS-mini04 | 垂直電泳槽(四板) |
BS-ZY03 | 轉(zhuǎn)印電泳槽(WB雙板和鉑樂(lè)通用) |
BS-ZY04 | 轉(zhuǎn)印電泳槽 (WB四板) |
BS-sub02 | 瓊脂糖電泳槽 |
注:以上資料僅供參考,具體產(chǎn)品信息請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
DNA凝膠電泳 天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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